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上海澤恒生物

  • 細(xì)胞增殖檢測(cè)

    ? ?細(xì)胞增殖是生物體的重要生命特征,細(xì)胞以分裂的方式進(jìn)行增殖。通過(guò)細(xì)胞分裂,可以將復(fù)制的遺傳物質(zhì),平均地分配到兩個(gè)子細(xì)胞中去。細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)包括MTT法和CCK8法。四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT方法)是通過(guò)快速簡(jiǎn)便的顏色反應(yīng)來(lái)檢測(cè)細(xì)胞存活數(shù)量。其原理是MTT可作為哺乳類動(dòng)物細(xì)胞線粒體中琥珀酸脫氫酶的底物。當(dāng)有活細(xì)胞存在時(shí),線粒體內(nèi)琥珀酸脫氫酶可將淡黃色的MTT還原成藍(lán)紫色的針狀甲瓚(Formazan)結(jié)晶并沉積在細(xì)胞中,結(jié)晶物能被二甲基亞砜(DMSO)溶解,用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在570nm波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度OD值,OD值的高低可間接反映活細(xì)胞的數(shù)量及其活性。 CCK-8試劑中含有WST?8,它在電子載體的作用下被細(xì)胞線粒體中的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan。細(xì)胞增殖越多越快,則顏色越深;細(xì)胞毒性越大,則顏色越淺。和MTT法相比,CCK-8法檢測(cè)靈敏度更高,產(chǎn)物更易溶解,檢測(cè)結(jié)果更加穩(wěn)定。

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