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上海澤恒生物

  • miRNA PullDown

    原理:miRNA pulldown這種方法,其主要流程是將生物素標(biāo)記的 miRNA 轉(zhuǎn)入胞內(nèi),讓其與 靶基因mRNA形成蛋白復(fù)合物(miRNP),再利用鏈霉親和素磁珠與生物素基團(tuán)的互作捕獲miRNA-mRNA 復(fù)合體。此后,將所捕獲的復(fù)合體中的 miRNA 以及與之結(jié)合的靶基因 mRNA純化出來,最后通過芯片檢測或者高通量測序檢測鑒定純化得到的靶基因mRNA,即為此 miRNA 的靶基因mRNA。

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    應(yīng)用:

    miRNA功能機(jī)制研究:現(xiàn)在芯片或者高通量測序技術(shù)已經(jīng)能大規(guī)模研究miRNA,然后通過功能研究篩選出我們感興趣的miRNA,但是這些miRNA的靶基因?qū)ふ疫€是一個(gè)難題,雖然有預(yù)測軟件可以預(yù)測miRNA的靶基因,然而很多研究也表明預(yù)測軟件的預(yù)測結(jié)果往往不準(zhǔn),miRNA pulldown技術(shù)體系能通過實(shí)驗(yàn)的辦法直接回收miRNA靶向結(jié)合的RNA,所以miRNA pulldown技術(shù)體系非常適合尋找miRNA的靶基因研究。

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    經(jīng)典文獻(xiàn):

    Orom UA, Nielsen FC, Lund AH. MicroRNA-10a binds the 5'UTR of ribosomal protein mRNAs and enhances their translation. Mol Cell. 2008;30:460–471.

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    服務(wù)模式:

    客戶提供:
    ① 活細(xì)胞:培養(yǎng)細(xì)胞至60-80%密度,然后加滿培養(yǎng)基寄給公司;
    ② 培養(yǎng)基信息;
    ③ miRNA基因信息、物種信息及ID。

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    公司提供:
    實(shí)驗(yàn)報(bào)告(材料、試劑、儀器、方法、數(shù)據(jù)分析、實(shí)驗(yàn)結(jié)果)。